Differential Clostridial Agar (DCA) (Merck 1.10259) Kuru gıdalarda sülfiti indirgeyen klostridiumların sayımı
için kullanılır. Bileşimi pepton (kazein) 5,0 g/L ; pepton (et) 5,0 g/L ; et
ekstraktı 8,0 g/L ; nişasta 1,0 g/L ; D(+) glikoz 1,0 g/L ; maya ekstraktı
1,0 g/L ; sisteinyum klorür 0,5 g/L ; resazurin 0,002 g/L ; agar 20,0 g/L şeklindedir.
Dehidre besiyeri 41,5 g/L olacak şekilde distile su içinde eritilir ve
otoklavda 121 oC 'da 15 dakika sterilize edilir. 45 oC' a
soğutulup, aseptik koşullarda, kullanımdan önce 5 ml/L taze hazırlanmış
ferric(lll) amonyum sitrat çözeltisi (5 ml distile suda 1 g çözülür,
otoklavda 121 oC 'da 15 dakika sterilize edilir) ve 7,5 ml/L sodyum sülfit
x 7 H2O çözeltisi (7,5 mL distile suda 0,75 g çözülüp, filtre
ile sterilize edilir) ilave edilir. Hazırlanmış besiyeri rengi sarımsıdan kırmızı-kahverengine
kadar değişebilir. 25
°C 'da pH
'sı 7,6±0,2 'dir. Besiyeri
hazırlandığında derhal kullanılmalı, depolanmamalıdır. Dökme yöntemi
ile ekim yapıldıktan ve agar katılaştıktan sonra aynı besiyeri ikinci kat
olarak 10 mL olacak şekilde dökülür. Anaerobik ortamda 30 oC 'da
3 gün inkübasyon sonucu 1-5 mm çapındaki siyah koloniler Clostridia
olarak sayılır. DCA besiyeri hakkında Merck
sayfalarından daha fazla bilgi
alınabilir. |