Fraser Listeria Selective Enrichment Broth Base
Fraser Listeria Selective
Enrichment Broth Base (Merck 1.10398)
Bileşimi Proteose peptone 5,0 g/L ; peptone from casein 5,0 g/L ; yeast
extract 5,0 g/L ; meat extract 5,0 g/L ; NaCl 20,0 g/L ; Na2HPO4 12,0 g/L ;
KH2PO4 1,35 g/L ; esculin 1,0 g/L ; lithium chloride 3,0 g/L şeklindedir.
Dehidre besiyeri distile su içinde 57,4 g/L olacak şekilde ve gerekirse ısıtılarak
çözülür ve otoklavda 121 oC 'da 15 dakika sterilize edilir. Hazırlanmış
besiyeri sarımsı kahverenginde, hemen hemen berrak ve 25 oC 'da pH 'sı 7,2±0,2
'dir. Fraser Broth besiyeri inhibitörsüz, yarım kuvvette (1/2) inhibitör
ilave edilmiş ve tam kuvvette inhibitör ilave edilmiş olmak üzere üç şekilde
kullanılır. İnhibitör ilave edilmeden besiyeri oda sıcaklığında 2 ay
saklanabilmekle beraber, inhibitör ilave edildiğinde aynı gün kullanılmalıdır.
İnhibitörsüz Fraser Broth L. monocytogenes sayımında seyrelti hazırlanması
ve canlandırma işlemi için kullanılır. Başlangıçta tüplere 9 'ar mL dağıtıldıktan
sonra sterilize edilmesi gerekir. Yarım kuvvette inhibitör ilave edilerek hazırlanmış
Fraser Broth besiyeri ISO yöntemi ile L. monocytogenes aranmasında ön
zenginleştirme için kullanılır. Selektif besiyerinin hazırlanması için
steril 1 litre Fraser Broth besiyerine oda sıcaklığında her ikisi de 1 'er
mL steril distile su içinde çözülmek üzere 1 şişe amonyum sitrat katkısı
ve 1 şişe selektif katkı ilave edilir. İyice karıştırılıp steril
erlenlere aseptik koşullar altında 225 'er mL dağıtılır. Tam kuvvette
inhibitör ilave edilmiş Fraser Broth besiyeri ISO yöntemi ile L.
monocytogenes aranmasında selektif zenginleştirme için kullanılır. Bu
selektif besiyerinin hazırlanmasında sterilize edilmiş 1 litre Fraser Broth
besiyerine oda sıcaklığında 1' er mL steril distile su içinde çözülmüş
1 şişe amonyum sitrat katkısı ve 2 şişe selektif katkı ilave edilir. İyice
karıştırılıp steril tüplere aseptik koşullar altında 10 'ar mL dağıtılır.
Fraser Broth besiyerinde Listeria türlerinin optimum gelişme koşulları yüksek
besin maddesi içeriği ve tamponlama kapasitesi ile sağlanmıştır. Refakatçi
floranın gelişimi önemli ölçüde lityum klorür, nalidiksik asit ve
akriflavin hidroklorür ile baskılanır. Listeria 'nın b-D-glucosidase
aktivitesi eskulin ve amonyum demir (III) sitrat ile belirlenir. Eskulin b-D-glucosidase
enzimi ile eskuletin ve glikoza parçalanır. Eskuletin demir (III) sitrat ile
zeytin yeşili-siyah renk veren kompleks yapar. Dolayısıyla besiyeri renginin
kararması Listeria türlerinin varlığını gösterir. 500 g olan 1 kutu
dehidre besiyeri ile 8,7 litre besiyeri hazırlanabilir. Bazal besiyerini yarım
ya da tam kuvvette selektif hale getirmek için Fraser Listeria Supplement
(Merck 1.10399) kullanılmalıdır. 1 pakette 8 şişe amonyum demir (III)
sitrat ve 8 şişe selektif katkı bulunur. Selektif katkı, 500 g olan 1 kutu
dehidre bazal besiyerinden yarım kuvvette selektif Fraser Broth besiyeri hazırlamak
için yeterlidir. Bu besiyeri hakkında
Merck
sayfalarından daha fazla bilgi alınabilir.
|