MSRV Medium
MSRV Medium (Merck 1.09878)
Bileşimi Tryptose 4,59 g/L ; casein
hydrolysate 4,59 g/L ; NaCl 7,34 g/L ; KH2PO4 1,47 g/L ;
magnesium chloride anhydrous 10,93 g/L ; malachite green 0,037 g/L ; agar 2,7
g/L şeklindedir. Diğer besiyerlerinden farklı olarak 15,8 g dehidre besiyeri 500 mL
distile su içinde tümüyle çözülünceye kadar kaynar su banyosunda tutulur.
Bu besiyeri otoklavlanmaz. Sterilizasyon kaynar su banyosunda besiyerini
eritirken yapılmış olur. Aşırı ısıtmadan kaçınılmalıdır. Besiyeri sıcaklığı
45 oC' a düştüğünde 1 mL steril distile su ile sulandırılmış
olan 1 şişe MSRV Medium selektif katkısı (Merck 1.09874) ilave edilir, karıştırılıp
steril Petri kutularına dökülür. Hazırlanmış besiyeri berrak ve mavi
renklidir, pH 'sı 25 oC 'da 5,4±0,2 'dir. Buzdolabında 2 hafta süre
ile depolanabilir. Diğer geleneksel Salmonella
izolasyon besiyerlerine kıyasla MSRV Medium besiyerinin daha iyi sonuçlar
verdiği belirtilmektedir. Bu besiyerinde Salmonella
belirlemenin prensibi Salmonella 'nın
yarı katı besiyerinde hareket ederken opak hale oluşturmasıdır. Hareketli
diğer refakatçi floranın hareketini magnezyum klorür, malahit yeşili ve
novobiosin varlığı ile 42 oC 'a yükseltilmiş inkübasyon sıcaklığı
engeller. Besiyeri kullanılmadan önce oda sıcaklığında en az 1 saat
tutularak yüzeyinin yeterince kuruması sağlanmalıdır. 500 g olan 1 kutu
dehidre besiyeri ile her Petri kutusunda 12,5 mL olacak şekilde 1265 adet Petri
hazırlanabilir. Bu besiyeri ile birlikte kullanılan MSRV Medium selektif katkısının
1 kutusunda 16 şişe vardır. Selektif katkının bileşimi 10 mg novobiosin/
şişe olup, 1 mL steril distile su ile çözülür. Her şişe 500 mL
besiyerine (40 Petri kutusu) ilave edileceğine göre 500 g olan 1 kutu dehidre
bazal besiyeri için toplam 32 şişe (2 kutu) selektif katkı gereklidir.
Dehidre besiyeri kullanım hacmine bağlı olarak stok selektif katkı miktarı
planlanmalıdır. Bu besiyeri hakkında Merck
sayfalarından daha fazla bilgi alınabilir. Salmonella hızlı analizi için
kullanılan bu besiyerine 42 oC 'da 16–20 saat inkübe edilmiş
Tamponlanmış Peptonlu Su kültüründen 3 noktaya damlatma yapılıp, Petri
kutusu ters çevrilmeden 42 oC 'da 24 saat inkübasyon yapılması,
inkübasyonun bu süreyi geçmemesi önerilmektedir. Hasar görmüş Salmonella
'nın canlandırılması için ön zenginleştirme sırasında 2-3 saat 37 oC
'da inkübasyon ve sonra kalan sürenin 42 oC 'da yapılması da önerilmektedir.
|